丛枝菌根真菌对三叶草根系分泌的有机酸组分和含量的影响

比较洗根法、层析纸法和琼脂膜法收集土培条件下生长的菌根化和非菌根化三叶草根分泌物的效果。试验采用三室根箱装置,将根系与菌丝生长空间分开,三叶草生长56d后,打开三室根箱装置,由于尼龙网的阻挡作用使根系均匀垫积在尼龙网内侧并形成根垫。分别采用洗根法、层析纸法和琼脂膜法3种方法收集三叶草根系分泌物,并通过高效液相色谱方法测定分泌物中草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、柠檬酸、丁二酸等有机酸的含量。结果表明:3种收集方法收集的三叶草分泌的有机酸无论在种类上还是在数量上都存在相当大的差别。从检测到的有机酸种类来看,琼脂膜法收集检测到苹果酸、乙酸、顺丁烯二酸、柠檬酸、丁二酸和乳酸6种有机酸;洗根法收集的分泌物检测到酒石酸、苹果酸、乙酸、顺丁烯二酸、柠檬酸、丁二酸和乳酸7种有机酸;层析纸法收集的分泌物检测到酒石酸、苹果酸、柠檬酸和乳酸4种有机酸。从收集到的有机酸数量来看,洗根法收集到的有机酸总量为29.97～232.7μg/(gfw·2h);琼脂膜法集到的有机酸总量为1.5～7.3μg/(cm2·2h);层析纸法收集的有机酸总量为0.23～6.58μg/(gfw·2h)。丛枝菌根真菌侵染对三叶草根系分泌的有机酸的组分和含量都有一定影响，洗根法和琼脂膜法收集到的分泌物都表现出菌根化三叶草分泌的有机酸总量低于莫菌根化三叶草的趋势。琼脂膜法和层析纸法是目前比较合适的收集土培植物根分泌物的方法。琼脂膜法可以反映植物的自然分泌状况，对分泌物吸附容量大，但琼脂膜在根系表面容易失水，准确定量有一定的困难，其结果只能是半定量；层析纸法的操作简单，能反映植物的自然分泌状况，但层析纸的吸附容量低，用于收集分泌物数量较大的植物可能更为合适；洗根法不是收集土培菌根分泌物的理想方法，此法虽然容易定量，但在收集的过程中，根系将遭受暂时的营养胁迫，不能真实反映植物的自然分泌状况，同时此方法容易伤害根系造成细胞内物质泄漏。