大蕉苯丙氨酸解氨酶基因的克隆、鉴定和表达分析

为了研究苯丙氨酸解氨酶基因与大蕉(musaabbcv.dongguandajiao)抗枯萎病的关系，利用rt-pcr和race技术克隆了大蕉苯丙氨酸解氨酶基因全长cdna。此cdna长1300bp，包含一个长为1191bp，编码397个氨基酸的完整开放阅读框（orf），推导的氨基酸序列与水稻pal基因氨基酸序列同源性达89%，将此基因命名为m-pal.southern杂交结果表明大蕉中存在一个包含4-5个pal基因的基因家族，将此基因克隆到大肠杆菌表达载体pet32(a+)中，表达的蛋白质分子量大小与推导的相一致，并且表达的蛋白质表现出pal酶活性。对接种香蕉枯萎病菌4号生理小种(fusariumoxysporumf.sp.cubense(foc)race4)后大蕉叶片中m-pal基因的转录谱进行研究表明，在接种枯萎病菌后m-pal基因在叶片中的转录水平提高，因此推测m-pal基因的表达可能与香蕉枯萎病抗性相关。