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热带亚热带植物学报 2009
柑橘叶片总rna的两种提取方法比较DOI: 10.3969/j.issn.1005-3395.2009.2.2185, PP. 190-193 Keywords: 柑橘,总rna,trlzol法,rt-pcr Abstract: 为了简便、快速提取高质量的柑橘(citrusreticulatabanco)叶片总rna,采用trlzol法,对北京天根公司rnaplantreagent和日本takara公司rnaisoreagent两种rna提取试剂进行比较并适当改进。结果表明:通过琼脂糖凝胶电泳,使用takara公司试剂提取的总rna28s和18s条带清晰,紫外分光光度计检测分析a260/a280为1.820,a260/a230为2.088,rna的浓度为2.840μgμl-1,用于rt-pcr反应可成功克隆柑橘β-actin看家基因228bp片段;采用天根公司试剂,琼脂糖凝胶电泳显示rna带型较模糊,紫外分光光度计检测分析a260/a280为1.464,a260/a230为1.603,rna的浓度为2.020μgμl-1,达不到rna的标准。takara公司rnaisoreagent试剂提取的柑橘叶rna纯度和完整性较好,能用于northern杂交、cdna文库的建立及基因克隆等分子生物学实验,为柑橘的进一步分子生物学研究奠定了基础。
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