红树植物秋茄叶片双向电泳技术体系的建立及优化

对适用于秋茄(kandeliacandel)叶片蛋白质组学研究的双向电泳技术体系进行了优化。结果表明,采用酚抽提法提取的蛋白质浓度较低,约1.7μgμl-1,sds-page电泳后几乎无条带;而采用改良tca-丙酮沉淀法可显著提高提取液中蛋白质的含量,可达12.4μgμl-1。秋茄叶片蛋白质主要分布在ph4~7的范围内,最适于采用ph3~10nl的胶条,17cm胶条的最适上样量为400μg,经银染后可得蛋白点约(564±34)个。用tca-丙酮沉淀法提取秋茄叶片全蛋白质组,按优化的参数进行双向电泳分离,获得了高分辨率、高重复性的图谱,可用于秋茄蛋白质组学研究。