香蕉果实smartcdna文库的构建及利用pcr方法筛选香蕉actin2基因

利用smart（switchingmechanismat5’endofrnatranscript）技术，提取果实少量总rna，经15-25轮ldpcr扩增获得全长ds-cdna，构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉（musaaaagroupcavendish）果实的cdna文库。所构建的文库容量为5×106pfuml-1，重组率93％。利用此cdna文库，采用96孔板pcr法筛选香蕉actin2基因，测序结果显示，序列全长1723bp，编码区长1134bp，编码378个氨基酸，与蝴蝶兰actin2基因序列同源率达83％，已递交genbank，接受号692696。