人工合成的植物化猪α乳清蛋白基因在转基因拟兰芥的表达

将一个398bp的植物化的猪α乳清蛋白基因(lactalbumin,la)编码区克隆到带有花椰菜花叶病毒的35s启动子的质粒中。对它们进行pcr检测和序列分析,证实这些阳性克隆是实验预期的重组质粒。随即将35s启动子-α-乳清蛋白基因-终止子这一表达单元克隆到双元载体pcg-cb中,用该重组质粒双元载体pcg-cb-lact转化农杆菌v3101后,以农杆菌法进行拟兰芥植物转化,用除草剂finale对转化植物进行抗除草剂基因筛选,得到一些抗除草剂的转化植株。对这些抗除草剂植株进行猪α乳清蛋白基因pcr分析,成功筛选到带有猪α乳清蛋白基因并且可以在后代稳定遗传的转基因植物。westernblot蛋白质表达分析,表明猪α乳清蛋白在拟兰芥中成功表达,并且猪α乳清蛋白被正确加工成天然蛋白。