应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子ref的互作蛋白

利用酵母双杂交系统,以橡胶树(heveabrasiliensis)橡胶延长因子基因ref的开放阅读框(orf)构建无自激活性的诱饵表达载体pbd-gal4-ref,并筛选以pad-gal4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cdna文库,对阳性克隆的cdna插入片段进行测序及生物学功能分析。通过酵母双杂交筛选,共获得5种可能与ref互作的候选蛋白质,它们分别为与诱饵蛋白ref高度同源的ref家族成员、小橡胶粒子蛋白(srpp)、翻译控制肿瘤蛋白(tctp)、激发子响应蛋白和泛素耦联酶e2,这表明橡胶延长因子ref除了与自身高度同源蛋白质可能存在相互作用之外,还可能与tctp和激发子响应蛋白等其它蛋白质发生相互作用。这些结果有助于揭示橡胶粒子的生物学功能。