巴西橡胶树hbwrky1基因的克隆及转化烟草的初步研究

利用race结合rt-pcr技术,从巴西橡胶树(heveabrasiliensis)总rna中扩增得到长度为1234bp的wrky基因cdna全长编码序列。通过氨基酸同源性比对,该序列推导的氨基酸序列与蓖麻、白杨的wrky同源性分别为79%和73%,表明分离的cdna序列为橡胶树wrky基因,命名为hbwrky1。通过构建pcambia1304-hbwrky1植物表达载体,经农杆菌gv3101介导,将hbwrky1基因导入烟草(nicotianatabacum)中,对所获得的潮霉素抗性烟草株系进行pcr鉴定。结果表明,hbwrky1基因已整合到65株转基因植株中。干旱胁迫试验表明,hbwrky1的过量表达可以明显提高转基因烟草对干旱胁迫的耐受能力。这说明wrky基因与橡胶树抗旱能力之间存在一定的关系。