矮牵牛f3,5h全长cdna的克隆及花特异启动子介导表达载体的构建

通过rt-pcr从蓝色矮牵牛(petuniahybrida)花瓣中克隆类黄酮-3,5-羟基化酶基因(f3,5h)全长cdna(genbank登记号ef371021)。生物信息学分析表明克隆的f3,5h基因与genbank登记号d14588、z22545和dq352142等的f3,5h基因序列高度一致；其编码的氨基酸序列与genbank登记号baa03438.1(矮牵牛)、bac10997.1(银杯草)和aav85470.1(马铃薯)的高度同源，同源率分别为99%、88%和87%。利用pbin19、pbluescriptsk(+)和pmd18-pchsa质粒成功构建了花特异性启动子pchsa驱动的f3,5h基因的表达载体pbin19-pchsa-f35h，并导入到野生型发根农杆菌k599中。利用k599诱导菊花生根，不定根的诱导率可达30.7%。这为利用转基因技术创造蓝色花卉提供了重要的基础。