巴西橡胶树顺式异戊烯基转移酶基因cdna克隆及其序列特征分析

以巴西橡胶树(heveabrasiliensis)胶乳的rna为tester；叶片rna为driver，利用抑制消减杂交法(suppressivesubtractivehybridization,ssh)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库。通过反式northern点杂交(reversenortherndotblots)筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因(橡胶生物合成的关键酶基因)高度同源的阳性克隆r363。采用race方法获得该克隆的全长cdna(genbank登陆号:ay461414)。序列分析表明，该基因长1156bp，含有873bp的阅读框，编码290个氨基酸，分子量约为32.9kd，等电点为7.2，含有n-端跨膜螺旋区。同源性分析表明r363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征，含有cis-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区，推测r363可能是一种新的顺式-异戊烯基转移酶基因。northernblot分析显示，r363在胶乳中高度表达，在叶中不表达。乙烯处理前后表达强度一致，表明该基因表达不为乙烯所诱导。