红锥基因组rapd反应体系的建立和优化

以红锥（castanopsishystrixa.dc.）嫩叶为材料，应用改良的ctab方法成功提取了红锥基因组dna，并对影响随机扩增多态dna（rapd）反应的各因素进行了优化，建立了红锥rapd的优化反应体系及程序。在25μl反应体积中，各组分浓度为：模板dna0.8ngμl-1,10×buffer2.5μl,mg2+2.0mmol/l,taqdna聚合酶0.8u,dntps0.35mmol/l,随机引物s420.28μmol/l。pcr循环程序为：94℃预变性3min,然后94℃30s，39℃1min,72℃2min,35个循环，最后72℃延伸10min,4℃保存。