苏云金杆菌营养期蛋白杀虫活性及vip3a-ls1基因克隆

对营养期高活性杀虫菌株进行筛选,得到高效菌株btls1,对其营养期杀虫蛋白活性及发酵特性进行了系统研究,克隆了该菌株的vip3a新基因。测定了31株vip3a基因阳性菌株营养期杀虫蛋白的活性,发现btls1和btls8菌株对甜菜夜蛾spodopteraexigua生长的抑制作用明显高于其他菌株。进一步研究表明,btls1菌株营养期杀虫蛋白对初孵和2龄甜菜夜蛾幼虫的体重增长抑制率分别为95.3%±2.1%和90.7%±6.6%;对棉铃虫helicoverpaarmigera初孵幼虫的校正死亡率为22.1%,对2龄幼虫的体重增长抑制率为78.7%±6.6%。发酵液中以胞内可溶性物质为主。设计vip3a全长基因特异引物pcr扩增,插入质粒pbluescriptsk(+),克隆测序证实该菌株中存在vip3a新基因,命名为vip3a-ls1,genbank登录号为dq016968。按该序列推断的蛋白与同类蛋白的8个氨基酸之间存在差异。