溴氰菊酯酶联免疫吸附分析方法研究

建立了定量测定溴氰菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-elisa)。合成了半抗原1-羧基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(med)和n-2-(羧基丙基)氨基甲酰基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(di)。分别采用碳二亚胺法和混合酸酐法将半抗原与牛血清蛋白(bsa)和卵清蛋白(ova)偶联制备了免疫原di-bsa和包被原di-ova、med-ova。将制得的溴氰菊酯免疫原免疫动物获得多克隆抗体,经间接非竞争elisa法测得其效价为2.5×105。通过对甲醇含量、离子强度、ph值等影响因素进行异源分析条件的优化,确立了溴氰菊酯间接竞争酶联免疫分析方法的最佳检测条件(30%甲醇、氯化钠0.4mol/l、ph7.5),并建立了标准竞争曲线。该方法的ic50值为0.55±0.05mg/l,检测限(ic10)为3.76±0.35μg/l,对大多数拟除虫菊酯无交叉反应。分别在自来水、河水和土壤样品中添加0.05~5.0mg/l(或mg/kg)的溴氰菊酯,回收率分别为89.7%~106.8%、82.4%~101.7%、75.6%~97.8%。