cry1ac敏感和抗性小菜蛾bre-3和bre-5基因mrna的表达差异研究

在室内选用cry1ac对小菜蛾plutellaxylostella3龄幼虫进行抗性选育,获得相对抗性为356倍的抗性种群dbm1ac-r品系。应用实时定量基因扩增荧光检测(realtimequantitativepcr,real-timeqpcr)技术检测敏感小菜蛾dbm1ac-s和抗性小菜蛾dbm1ac-r品系鞘糖脂(glycosphingolipids,gsls)合成酶基因bre-3和bre-5mrna在2龄、3龄、4龄和老熟幼虫、蛹及4龄中肠的表达情况。结果显示:bre-3和bre-5在两个品系的5个时期和4龄中肠均有表达,其中dbm1ac-s品系的bre-3mrna在3龄、4龄和老熟幼虫的相对表达量显著高于dbm1ac-r品系(p<0.05),分别为dbm1ac-r品系的2.36、5.54和2.68倍;dbm1ac-s品系的bre-5mrna在2龄至蛹期的相对表达量分别为dbm1ac-r品系的1.19、3.13、1.78、1.75和1.65倍,其中由3龄到蛹期差异显著(p<0.05)。dbm1ac-r品系3龄至老熟幼虫的bre-3和bre-5mrna相对表达量降低可能与小菜蛾长期的cry1ac汰选有一定的关系。比较同一种群、同一龄期(包括4龄中肠)的bre-3和bre-5mrna相对表达量差异时,发现bre-5相对表达量均高于bre-3。研究结果为苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis,bt)杀虫晶体蛋白受体之一gsls的进一步研究提供了一定的基础。