葡萄球菌肠毒素das-elisa检测方法的建立及应用

？为筛选特异性强、亲和力高、可夹心配对单克隆抗体4a2和5c12，通过方阵试验优化工作条件，建立金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcalenterotoxins，ses)的双抗体夹心-酶联免疫吸附试验定量检测方法。结果表明：该方法标准曲线为y＝4.074x－1.1888，r2＝0.9892，检测下限为0.307μg/ml，批内和批间变异系数均小于10%，脱脂乳粉中ses掺入试验测定回收率为103%～107%，特异性、重复性和稳定性良好；应用所建双抗体夹心-酶联免疫吸附试验方法，对数株葡萄球菌分离株体外培养上清中ses产生的动态变化进行分析表明，不同菌株ses分泌能力不同，且0～20h分泌量不断增加，对鲜牛乳和猪淋巴组织匀浆中的ses进行检测，检出率分别为51.7%和59.1%，并与进口商品化试剂盒检测结果比对，一致率达92.5%，表明食品中ses污染的普遍存在。所建方法灵敏高效，可为食源性污染监控提供有效手段。