溶血性链球菌LAMP检测方法的建立

目的：研究溶血性链球菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)检测方法，实现对溶血性链球菌的快速检测。方法：针对溶血性链球菌的scpA 基因设计4 条特异性LAMP 内外引物进行LAMP扩增；优化扩增反应条件；采用包括溶血性链球菌在内的6 种不同菌株进行LAMP 的特异性检测，并酶切鉴定；对溶血性链球菌菌液以无菌水进行10 倍系列梯度稀释后，进行LAMP 扩增检测其灵敏度；将菌掺入牛奶样本并进行LAMP 检测。结果：本法可快速灵敏地检测出溶血性链球菌，反应特异性高，检出限为16.7CFU/mL，而牛奶样本的检出限则达10CFU/mL。结论：LAMP 法可用于食品溶血性链球菌的快速检测