应用DPO-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7

利用双启动寡核苷酸引物（dual-priming oligonucleotide，DPO）聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7。根据DPO引物设计原则，以肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE 基因为靶基因设计一对DPO引物，经过反应体系的优化，建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DPO-PCR检测方法， 其检测灵敏度约为94 CFU/mL。与常规PCR方法相比，所建立的DPO-PCR方法对退火温度不敏感，在引物设计和实 验过程中不需要对引物及其退火温度反复优化，同时基于DPO引物的特殊结构又增强了其特异性。DPO-PCR方法 设计简易、特异性强，为致病性微生物的快速准确检测提供了新途径