sds-page-薄层扫描联用法测定三种不同来源的乳铁蛋白

？目的：建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法：在对样品脱脂和去除酪蛋白时，水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis，sds-page)分离乳清蛋白，薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化，电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/ml、分离电压100v、上样量5μl、染色3h、脱色2h；薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式，y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果：可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白；乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%，同板精密度rsd值为3.1003%和1.8151%，在100～2000μg/ml范围内呈线性关系，相关系数为0.9988和0.9990。结论：此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。