亲和层析法分离纯化纳豆激酶

？目的：以纳豆激酶的作用底物纤维蛋白为配基制备亲和层析胶，分离纯化纳豆激酶。方法：纳豆杆菌发酵液经硫酸铵分段盐析、透析得粗酶，在4℃条件亲和层析法分离纯化，利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis，sds-page)对酶纯度进行检验。结果：经亲和层析得纳豆激酶为电泳纯，纯化倍数为8.3，回收率43.9%。纯酶的最适ph值和温度分别为ph7.0～9.0、50℃；温度高于60℃纤溶酶活性迅速下降；在ph6.0～10.0范围内稳定性好；mg2＋对其有微弱激活作用，cu2+有显著抑制作用。结论：以琼脂糖包埋纤维蛋白制备的层析胶可用于纳豆激酶的快速分离纯化。