新霉素elisa检测方法的建立

？目的：比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzymelinkedimmunosorbentassay，elisa)的优缺点，建立新霉素残留elisa检测方法。方法：利用自制的新霉素多克隆抗体，采用直接竞争和间接竞争elisa方法检测新霉素残留，并比较两种方法的优缺点。结果：新霉素抗血清和庆大霉素的交叉反应率为2.04%，和卡那霉素的交叉反应率为0.02%，和氨苄青霉素、红霉素、四环素的交叉反应率均小于0.01%。初步测试新霉素间接竞争elisa法的准确性和回收率。板内误差小于4%，板间误差小于11%，回收率为135.5%～191.3%。直接竞争和间接竞争elisa方法的检测极限分别为28.58ng/ml和51.74ng/ml，达到了国家对新霉素规定的500μg/kgmrl检测限。结论：建立了直接竞争和间接elisa吸附检测方法，条件优化更成功的间接竞争elisa可用于开发新霉素检测试剂盒。