鲢鱼卵高分子质量cpi-i的纯化与鉴定

？以鲢鱼卵为材料制备半胱氨酸蛋白酶抑制因子(cpis)的粗提浓缩液，进而经qsepharosefastflow阴离子层析和sephacryls-200分子筛层析，获得部分纯化了的cpi-i。以偶氮酪蛋白(azocasein)法监测粗提液及层析纯化中cpis的抑制活性。层析过程中，以灵敏度更高的荧光合成肽底物(z-phe-arg-mca)法监测洗脱物的cpis抑制活性的热稳定性。最终鲢鱼卵cpi-i被纯化了72倍，酶回收率为10.25%。利用sephacryls-200分子筛层析marker标准曲线以及反相酶谱法，初步判断cpi-i的分子质量为89kd。高碘酸-schiff试剂(pas)染色法证明该蛋白为糖蛋白。cpi-i能够抑制鲢鱼组织蛋白酶l，且具有显著的热稳定性。