樱桃谷鸭胸肉脂肪氧合酶的分离纯化及其酶学特性研究

用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sepharose柱层析法分离纯化樱桃谷鸭胸肉中脂肪氧合酶(lipoxygenase，LOX)，同时对酶学性质进行研究。结果显示：在DEAE-Sepharose柱层析时，当NaCl洗脱浓度在0.3～0.35mmol/L时，LOX被分离出，LOX经过分离纯化后其纯化倍数可达到54.3，SDS-PAGE电泳显示其分子质量约为96kD；粗酶和纯酶性质略有不同；以亚油酸为底物，粗酶和纯酶的最适底物浓度分别为6.4、10mmol/L，最适反应温度分别为40、30℃，最适pH值分别是5.0、5.5；纯酶Km=1.139mmol/L、Vmax=0.07608U/min，纯酶与底物的亲和能力大于粗酶