来自基因工程菌e.colibl21/pet-dsba-malq的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究

？通过6-his的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶。通过使用凝血酶切割dsba-malq融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性。该酶的最适温度为37℃,最适ph值为6.5。当处理温度小于40℃时,酶的活力基本保持在最高活性的80%以上,相对稳定;在酶的ph耐受方面,在ph5.5～8.0范围内较稳定。金属离子和edta对酶活性的影响实验表明,edta对酶活的影响不大,但zn2+、cu2+、hg2+、ag+对酶蛋白有较强的抑制作用,而ca2+、mg2+、mn2+等对表达的酶有一定的激活作用。在37℃,ph6.5时以麦芽三糖为底物测得酶促反应的km值为0.378mmol/l,vmax值为1.979mmol/(l·min)。