凡纳滨对虾过敏原精氨酸激酶的质谱鉴定及其免疫交叉反应研究

目的：鉴定凡纳滨对虾分子质量40 kD过敏原，并分析其在有壳水产食物中的免疫交叉反应。方法：运用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪（matrix assisted laser desorption ionization/time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF/TOF-MS）鉴定凡纳滨对虾40 kD过敏原组分；使用软件BLAST、Clustal X2、MEGA 5.0分析该蛋白氨基酸序列的种间同源性；制备抗凡纳滨对虾过敏原精氨酸激酶的多克隆抗体，并与17 种常见有壳水生动物粗提液进行Western blotting，以分析该过敏原的免疫交叉反应。结果：凡纳滨对虾40 kD过敏原为精氨酸激酶（arginine kinase，AK）；其氨基酸序列同源性分析显示AK在虾类（96%～100%）、蟹类（91%～93%）、贝类（49%～52%）、蟑螂（83%）中具有很高的同源性；Western blotting结果显示抗AK多抗与17 种不同虾类、蟹类、贝类的AK均能发生反应。结论：精氨酸激酶在甲壳类动物、软体动物、甚至昆虫中具有高度保守性，且能引起强免疫交叉反应，是有壳水生动物中的一种泛过敏原