蕹菜叶酪氨酸酶的分离纯化与部分性质

蕹菜叶经匀浆、缓冲液提取、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析，获得电泳纯的酪氨酸酶。该酶活力达到114.53 U/mg，酶活力回收率为11.33%，纯化倍数为99.59。全酶分子质量为77.60 kD，亚基分子质量为38.70 kD；最适温度为45 ℃，最适pH值为7.5，该酶在25～55 ℃及pH 6.0～8.0的范围内有较好的稳定性；在最适条件下测得其Km值为10.05 mmol/L；甲醇、乙醇、异丙醇及柠檬酸、抗坏血酸、Ca2+和Pb2+对该酶有抑制作用，Mn2+、Zn2+和Co2+对该酶具有一定的激活作用，尿素和十二烷基硫酸钠（sodium dodecylsulfonate，SDS）对该酶活性影响不大，Li+、K+对该酶活性基本没有影响