脯氨酸存在下酪蛋白ACE抑制肽的Plastein反应修饰

利用枯草杆菌碱性蛋白酶水解酪蛋白制备ACE 抑制肽，其IC50 为47.1μg/mL；采用相同酶催化ACE 抑制肽和脯氨酸进行Plastein 反应，对ACE 抑制肽进一步修饰，并用响应面分析法优化反应条件。在ACE 抑制肽质量分数为35%，反应时间为6h，以反应体系游离氨基减少量为指标，得到适宜的反应条件为：温度为47.8℃、脯氨酸比例为0.54、酶添加量为9.5kU/g pro，此条件下体系游离氨基减少量约195.7μmol/g pro。在适宜条件下改变反应时间对酪蛋白ACE 抑制肽进行同程度的Plastein 反应修饰，制备出6 个修饰程度不同的多肽混合物并测定它们的ACE 抑制活性、计算其IC50 值。结果表明：修饰产物的ACE 抑制活性随修饰程度的增加不规则变化，当反应体系的游离氨基减少量为195.7μmol/g pro 时，修饰产物的IC50 降低至0.2μg/mL