chelex法结合环介导间接pcr检测肉制品单增李斯特菌

？目的：建立肉制品中单增李斯特菌环介导间接聚合酶链式反应检测体系，实现快速检测。方法：采用chelex法从肉制品中分离模板dna，根据单增李斯特菌hlya基因的保守区设计两条探针，将探针标记于报告基因(大豆lectin基因)的两端，此标记的报告基因与待测靶基因经杂交、缺口补平、环化后，采用反向聚合酶链式反应扩增报告基因，实现对靶基因的检测。结果：该检测体系检出限低于100cfu/g(ml)，且与其他食源性致病菌的检测无明显交叉反应，对200份肉制品进行检测，阳性率为2.5%，与传统细菌分离检测结果完全相符。结论：环介导间接聚合酶链式反应可以快速、灵敏、特异检测肉制品中单增李斯特菌污染。