响应面法优化脂肪酶的固定化条件及其水解橄榄油的特性研究

？采用sepharosecl-4b和7种大孔树脂为载体固定palatase20000l脂肪酶，对载体进行筛选，以酶活力为指标，采用响应面法优化固定化条件，并考察所制得固定化酶的稳定性和水解橄榄油的酶学性质。结果表明：以大孔树脂hpd-600为载体制得的固定化酶具有较高的活性和良好的稳定性。其最优的固定化条件为：ph3.9，酶与载体比例为9.1mg/g，吸附时间1.8h。在最优条件下制得固定化酶在最适合条件下测得的酶活力达到1440u/g，酶活回收率大于50%。固定化酶最适作用温度为50℃，最适作用ph值为8.0。固定化酶的km值为0.130g/ml，高于游离酶的km(0.069g/ml)。固定化酶的热稳定性有一定程度的提高，其重复操作5次后相对酶活力仍保持在58%以上。