发酵乳杆菌细胞壁蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究

？研究分离纯化发酵乳杆菌细胞壁蛋白酶(cellenvelopeproteinase，cep)的方法及其酶学性质。用50mmol/ltris-hcl缓冲液(ph7.8)悬浮菌体，进行超声波破碎，细胞质量浓度为0.06g/ml，破碎功率330w，工作220次(工作时间3s，间隔时间5s)，离心取上清液即为粗酶液。60%硫酸铵沉淀，sephacryls-300hr凝胶层析，native-page割胶回收纯化发酵乳杆菌的cep。用纯化的cep酶解脱脂乳，酶解液ace(angiotensini-convertingenzyme)抑制率为50%。sds-page检测cep分子质量为32.5kd，最适酶反应温度为41℃，最适酶反应ph值为8.0。mg2+、co2+、ca2+对cep活性有激活作用；zn2+、ni2+、pmsf、edta对cep活性有抑制作用，说明cep为丝氨酸蛋白酶且酶的活性中心结构的维持与金属离子有关。