Taqman MGB PCR定量检测水产品中沙门氏菌的方法建立

建立采用Taqman MGB实时荧光PCR法快速定量检测水产品中沙门氏菌。根据沙门氏菌fimY基因保守序列，设计引物和Taqman MGB探针，建立Taqman MGB实时PCR定量检测体系。采用本方法对24株共14种血清型沙门氏菌和17株与沙门氏菌亲缘关系比较近，以及在样品中能同时存在的常见食源性致病菌菌株进行PCR扩增。结果显示：所有的沙门氏菌菌株结果均为阳性，而非沙门氏菌菌株检测结果均为阴性，反应特异性为100%。本方法的纯菌最低检测低限为13CFU/ml，样品江瑶贝和蚬子肉中添加肠炎沙门氏菌的最低检测低限为130CFU/ml；香螺肉中添加肠炎沙门氏菌的最低检测低限为1300CFU/ml。定量关系式为y=－3.381418lnx+45.115715，R2= 0.964878。整个实验2h即可完成，可应用于水产品中沙门氏菌污染状况调查及快速检测