两步荧光法检测牛乳中大肠杆菌的研究

本文主要进行了两步荧光检测牛乳中大肠杆菌的研究,确定了两步荧光法的基本条件和过程。其过程为将大肠杆菌菌悬液在TB培养基中进行12h的预培养后,取出0.1ml菌液加入到1.5ml的离心管中,再加入0.2mg/mlMUG底物0.1ml和100μg/ml的多粘菌素B0.05ml培养45min,最后加入pH10.4的0.2mol/LGly-NaOH缓冲液1.75ml终止反应,使用荧光分光光度计测荧光密度。空白样为0.1mlmol/LUG底物加0.05ml100ug/ml的多粘菌素B,再加0.2mol/LpH10.4Gly-NaOH缓冲液1.75ml