重金属铅多克隆抗体的制备及鉴定

目的：合成铅离子完全抗原，并对其进行鉴定；用合成的完全抗原免疫Balb/c 小鼠制备多克隆抗体，鉴定效价和特异性。方法：用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA 将Pb2+ 与载体蛋白BSA 和OVA 偶联在一起，合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA)，并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP) 检测抗原中Pb2+ 含量，以及通过免疫Balb/c 小鼠，采集血清进行间接ELISA 和竞争ELISA 检测。结果：两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后，紫外吸收峰偏移等现象；免疫的4 号和5 号Balb/c 小鼠的抗血清效价达1:400000；与OVA 无交叉反应，ELISA 检测IC50 值为1.5ng/mL，与Fe3+ 有近5% 的交叉反应，与其他重金属离子的交叉反应均小于1%。结论：铅离子多克隆抗体制备成功