尿素对经动态高压微射流(dhpm)诱导去折叠胰蛋白酶构象变化的影响

？以牛胰蛋白酶为原料，通过紫外吸收光谱、荧光发射光谱和圆二色谱研究尿素对天然胰蛋白酶和经动态高压微射流(dhpm)诱导去折叠胰蛋白酶的构象变化。结果显示：天然胰蛋白酶构象在尿素浓度4.0～6.0mol/l之间变化最显著，紫外吸光度从0.2746降至0.1824，吸收峰从波长279nm红移至283nm，相对荧光强度从105.9降至98.27，发射峰从波长352nm红移至355nm，β-折叠含量从46.9%降至30.6%；而去折叠胰蛋白酶构象在尿素浓度2.0～4.0mol/l之间变化最显著，紫外吸光度从0.3121降至0.2159，吸收峰从波长281nm红移至283nm，相对荧光强度从108.24降至99.07，发射峰从波长353nm红移至360nm，β-折叠含量从40.6%降至38.9%。表明尿素对经dhpm处理后处于部分去折叠胰蛋白酶构象的影响更为显著。不同浓度尿素导致胰蛋白酶产生不同构象的中间体，表现出“熔球态”模型特征。