短乳杆菌发酵生产尿苷磷酸化酶条件的优化

采用响应面法对短乳杆菌产尿苷磷酸化酶发酵培养基及发酵条件进行优化。以葡萄糖酵母膏培养基为基础培养基，通过单因素和Plackett-Burman设计法确定促进尿苷磷酸化酶合成的4个较为重要的有效因子：葡萄糖(P=0.002)、酵母粉(P=0.054)、磷酸根(P=0.059)和尿苷(P=0.001)；在此基础上采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域，并利用Box-Behnken设计对影响显著因素进行优化，得到最适培养基组成和培养条件为：NaCl 5g/L、葡萄糖18.30g/L、酵母粉15.71g/L、蛋白胨15g/L、磷酸根3.99g/L、肌苷20mmol/L、尿苷21.38mmol/L、初始pH8.0、摇床转速110r/min、发酵温度32℃、培养时间14h、接种量1.0%。在此优化条件下，短乳杆菌产尿苷磷酸化酶能力达到1.325U/mg，较优化前(0.883U/mg)提高了50.0%