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ISSN: 2333-9721
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食品科学  2011 

转基因玉米59122品系的特异性检测

Keywords: 转基因作物,品系特异性检测,半巢式聚合酶链式反应,反向聚合酶链式反应,二重聚合酶链式反应

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Abstract:

?使用反向聚合酶链式反应(pcr)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式pcr技术建立了59122的品系特异性二重pcr检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、mon863、mon810、ga21、nk603,转基因大豆roundupready和转基因油菜gt73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性dna的最佳质量浓度为1ng/μl左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规pcr定性检测后的验证方法。

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