食品中单增李斯特菌环介导等温扩增检测技术

？目的：建立一种快速、简单地检测食品中单增李斯特菌的环介导恒温基因扩增方法(loop-mediatedisothermalamplification，lamp)，并初步建立荧光定量lamp检测单增李斯特菌的方法。方法：根据lamp方法的原理，设计lamp检测引物，建立lamp检测方法，同时对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数值与反应时间之间的线性关系进行评估。结果：使用lamp引物可以在0.5h内完成检测工作；lamp检测技术的灵敏度高出聚合酶链式反应检测技术100倍以上，检出限达到1.72×101拷贝/反应，与其他食源性致病菌无交叉反应，平均实验间变异系数小于5%；反应时间与初始模板浓度的常用对数值有良好的线性关系(r2=0.9994)。结论：本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点，具有广阔的应用前景。