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ISSN: 2333-9721
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食品科学  2014 

iptg与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达

Keywords: 异丙基-&beta,-d-硫代吡喃半乳糖苷,乳糖,右旋糖酐蔗糖酶,表达,联合诱导

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Abstract:

?研究异丙基硫代-β-d-呋喃半乳糖苷(isopropyl-β-d-1-thiogalactopyranoside,iptg)与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达的效果。在利用iptg和乳糖分别作为诱导剂对右旋糖酐蔗糖酶工程菌escherichiacolibl21(de3)/pet28-dexyg进行诱导表达的基础上,尝试将此两种诱导剂联合使用,在降低成本的同时获得较好的表达效果。在获得最佳培养基的基础上,考察菌体iptg与乳糖的联合加入量、菌体浓度、诱导时间对右旋糖酐蔗糖酶表达的影响。在菌浓(od600nm)达到3.0时,加入0.1mmol/liptg95μl+2.5g/l乳糖,25℃混合诱导培养4h,酶活力最高,达到40.44u/ml。iptg与乳糖联合诱导重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶表达可行。

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