毛柄金钱菌gpd启动子驱动福寿螺纤维素酶基因在灰盖鬼伞菌中的表达

？为研究毛柄金钱菌gpd启动子驱动福寿螺纤维素酶基因(mfc)在大型丝状真菌中的表达效果，本实验通过构建毛柄金钱菌gpd启动子驱动的mfc基因的真核表达载体，采用peg(polyethyleneglycol)介导法将目的基因重组进色氨酸营养缺陷型灰盖鬼伞菌染色体，对转化子进行pcr、southernblotting、rt-pcr等分子鉴定，通过测定滤纸酶、cmc酶和木聚糖酶的活力考察mfc的表达效果。结果表明：多功能纤维素酶基因整合入灰盖鬼伞基因组中，毛柄金钱菌gpd启动子能够高效驱动mfc基因的表达，其中酶活力最高的工程菌株为cfvlm9，其滤纸酶活力、cmc酶活力和木聚糖酶活力分别为21.5、44、235u/ml，分别是对照的1.79倍、1.6倍和2.97倍。