一种新的等温扩增技术检测阪崎肠杆菌

目的 建立一种新型阪崎肠杆菌快速筛选检测方法——交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法。方法 针对阪崎肠杆菌16S-23S rDNA间区序列设计特异性引物及探针，建立交叉引物等温扩增法，利用免疫金标试纸条对结果进行检测。用18株阪崎肠杆菌，36株近源菌进行特异性试验；通过定量DNA、纯菌液计数、添加干扰菌检测进行灵敏度验证。结果 建立方法具有很好的特异性；增菌液检测灵敏度为101 cfu/mL，DNA检测灵敏度为100fg/test。结论 建立的交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法特异性好、灵敏度高，不需要复杂仪器，对口岸快速筛查、基层或偏远经济不发达地区顺利开展检测具有实际意义