梅花鹿s100a4基因rnai重组慢病毒载体的构建

？本研究针对东北梅花鹿s100a4基因筛选出若干条rnai靶位点,并利用ncbi中的blast工具去除脱靶情况,最终得到2条高分靶位点。然后在t4连接酶的作用下,将其与载体质粒plvthm的酶切产物进行连接,并通过pcr鉴定及测序筛选出阳性质粒。plvthm阳性重组质粒与pmd2.g及pcmv-dr8.91共转染到293t细胞中。在倒置荧光显微镜下观察转染效果并进行收获病毒质粒。结果显示在转染24h后,在293t细胞中观察到了绿色荧光。本研究成功构建出针对梅花鹿s100a4基因的慢病毒载体,为以后进一步研究s100a4基因在鹿茸再生中的具体功能与机制打下了基础。