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兽类学报 2007
麋鹿血液cdna文库的构建Keywords: 麋鹿,血液组织,cdna文库,主要组织相容性复合体 Abstract: ?为分离出mhcⅰ、ⅱ基因,利用trizol试剂从麋鹿血液组织中提取总rna,经mrna纯化试剂盒纯化后,根据stratagene公司的cdna文库构建系统构建了麋鹿血液组织的cdna文库。初始文库滴度为1.96×106pfu/ml,总库容为1.96×106个独立克隆;cdna插入片段平均长度约为1.0kb;重组率为95.6%。文库各项指标均达标准经典cdna文库的基本要求。利用本实验室设计的可扩增mhcⅱ类dqa基因第二外显子的引物检测扩增后的文库,得到了特异性非常好的目标条带,说明本文所建文库可以用于麋鹿mhc相关基因的分离。
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