金葡菌肠毒素c2的克隆表达及其生物学活性

目的克隆金葡菌肠毒素c2全长基因，构建sec2的表达载体，实现其可溶性表达，并对纯化的rsec2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction，pcr)从金葡菌fri1230菌株基因中得到肠毒素sec2的基因，将其克隆至融合表达载体pgex-4t-1，转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化。通过考察重组sec2对淋巴细胞的增殖作用及其对肿瘤细胞杀伤活性的影响，对其超抗原活性和免疫学活性进行研究。结果得到正确的肠毒素sec2基因序列并得到高效表达的融合蛋白，mtt法结果表明，重组sec2表现出良好的促淋巴细胞增殖活性，且能够增强淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结论本研究成功克隆了sec2基因，表达并纯化出具有抗肿瘤生物学活性的重组sec2蛋白，为进一步对其分子抗肿瘤作用机制进行研究以及构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础。