dna条形码鉴定洋金花及其伪品

为建立有毒中药洋金花及其伪品dna条形码鉴定方法,采用国际通用的条形码序列its2、psba-trnh、matk和rbcl对洋金花原植物白花曼陀罗及其伪品毛曼陀罗、曼陀罗和木本曼陀罗4个种共计20份材料进行了比较研究。pcr及测序成功率分别为its2(100%)、matk(100%)、psba-trnh(90%)、rbcl(85%)。采用codoncodealigner进行序列拼接,采用mega4.1计算白花曼陀罗及其伪品的种内、种间的k2p距离,并基于k2p模型构建nj树。结果显示its2序列共有30个单核苷酸多态性(snps)位点、psba-trnh序列有33个单碱基的插入和缺失。its2和psba-trnh序列种间遗传距离大于种内,matk和rbcl种内和种间没有明显“barcodinggap”。4个条形码序列及其组合获得的分子系统树(its2、psba-trnh、matk、rbcl、matk+rbcl)均分成了两大支,木本曼陀罗单聚为一支,该分子证据支持将brugmansia提升为属水平。实验结果表明its2及psba-trnh序列可以作为洋金花及其伪品鉴定用的条形码序列。