hplc-ms/ms法定量研究比格犬灌胃替诺福韦酯后替诺福韦血浆药代动力学

本研究应用hplc-ms/ms技术建立比格犬血浆替诺福韦的定量测定方法,并用于比格犬灌胃两种替诺福韦酯后的血浆药代动力学和等效性研究。液相色谱分离采用zorbaxsb-c18(3.5μm,100mm×2.1mm,agilent,usa)柱,流动相为甲醇/水(0.3%甲酸),梯度洗脱,流速为0.2ml·min？1;质谱检测采用电喷雾(esi)离子源,正离子选择离子检测(srm)方式检测。血浆样品经20%三氯乙酸沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z288.1～176.2(替诺福韦),m/z274.1～162.2(阿德福韦,内标)。经方法学验证,替诺福韦在犬血浆中线性关系良好(10～5000ng·ml？1),日内和日间精密度≤6.3%、回收率高且血浆样品稳定性好,表明该测定方法特异、快速、准确、可靠,可满足替诺福韦比格犬血浆动力学研究需要。8只比格犬采用2×2交叉给药,分别单剂量灌胃受试药物富马酸替诺福韦双特戊酯(bp0018)和参比药物富马酸替诺福韦二吡呋酯。与参比药物相比,比格犬单次灌胃bp0018后,替诺福韦的平均滞留时间(mrt)和消除半衰期(t1/2z)略有延长,而auc0？t、auc0？∞、cmax和tmax均无显著差异(das2.0等效性统计分析),提示比格犬单次灌胃bp0018和富马酸替诺福韦二吡呋酯后产物替诺福韦的血浆药代动力学无显著差异,两药基本生物等效。