livin基因和survivin基因联合靶向sirna抑制大肠癌细胞增殖的作用

采用1个载体编码2个shrna技术,构建livin基因和survivin基因联合靶向的sirna重组表达载体,研究其对人大肠癌细胞生长协同抑制的增效作用。构建livin基因和survivin基因联合靶向的sirna重组表达载体并转染大肠癌细胞,通过rt-pcr和westernblotting方法检测livin基因与survivin基因的表达,利用流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡效应。经酶切鉴定和测序分析证实livin基因和survivin基因联合靶向的sirna重组表达载体构建成功,它对大肠癌细胞livin和survivinmrna的抑制率分别为27.90%和32.24%,对livin和survivin蛋白表达的抑制率分别为22.28%和40.86%,诱导肿瘤细胞凋亡率为(11.69±1.37)%,但协同干扰作用比单独干扰livin基因或survivin基因弱。livin基因和survivin基因联合靶向的sirna重组表达载体构建成功并能抑制livin基因和survivin基因的表达,但协同抑制作用比单独干扰livin基因或survivin基因弱。