谷氨酰胺∶6-磷酸-果糖酰基转移酶抑制剂细胞筛选模型的建立

目的建立己糖胺途径的关键酶谷氨酰胺∶6-磷酸-果糖酰基转移酶(glutamine∶fructose-6-phosphateamidotransferase,gfat)抑制剂的细胞筛选模型。方法用改进的gdh法测定gfat的活性。以速效胰岛素依赖的葡萄糖摄取观察细胞对胰岛素的反应性；用长效胰岛素诱导hirc细胞，形成己糖胺途径过度活跃和胰岛素抵抗的细胞模型，并应用该细胞模型和gdh法筛选gfat抑制剂。结果用25nmol·l-1长效胰岛素刺激hirc细胞36h，可明显激活己糖胺途径，使gfat活性上升47%；同时产生胰岛素抵抗，使速效胰岛素依赖的葡萄糖摄取能力降低21%。azaserine可明显抑制该模型中gfat的活性。结论长效胰岛素既可过度激活hirc细胞己糖胺途径，又可使其产生胰岛素抵抗。该模型可用于筛选gfat抑制剂。