快速分离与鉴定天山堇菜中的天然环肽

为快速准确地分离鉴定天山堇菜的天然环肽分子,采用50%乙醇浸提、不同极性溶剂萃取,利用sephadexlh-20对含有环肽的正丁醇部分进行色谱分离,然后直接利用dtt还原分离的组分,结合反相高效？液相色谱(rp-hplc)和质谱跟踪确定含有环肽的组分差异洗脱峰,进而分离纯化获得单体分子;利用dtt还原二硫键、碘乙酰胺烷基化保护被还原产生的巯基、蛋白酶endo-glu-c、endo-lys-c和胰蛋白酶酶解、结合rp-hplc分离获得肽段;用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(malditof/tofms)进行质谱分析,鉴定了2个环肽分子,其中一个新的环肽分子命名为cycloviolacint1,另一个为已知结构的varve。通过此研究建立了一套直接利用dtt还原色谱分离组分、结合malditof/tofms检测进而鉴定天然环肽分子的解析方法。