中药黄草石斛rdnaits序列分析

目的　研究黄草石斛its片段遗传多样性,分析该片段在黄草药材dna分子鉴别和石斛属植物系统学研究中的意义。方法　用一对引物进行pcr扩增,扩增产物纯化后用双脱氧终止法(sangerdideoxy)测序。结果　获得核糖体dna中its和58srdna完整序列,14个石斛类群的its1与its2序列的长度分别为228-233bp和242-247bp。石斛种间its1序列的差异百分率为11.79%-31.58%,its2序列的差异百分率为10.29%-25.30%,金钗石斛种内its1序列的差异百分率为0.87%,its2序列无差异。石斛各类群与外类群的差异百分率its1序列为23.56%-36.89%,its2序列为26.5.2%-33.31%。用nj法根据its1与its2序列数据重建系统发生树。结论　两段序列在石斛种内保守,在种间有较大的差异,与外类群的差异最大,可作为中药黄草石斛分子鉴定的标记,而石斛属的系统发生关系尚须进一步研究