cdna芯片技术杂交效率的优化

目的cdna芯片杂交影响因素很多,如固定于玻片的dna片段的浓度、溶解dna片段的点样液、荧光探针浓度及纯度杂交液、杂交温度、杂交时间和cy3与cy5荧光素标记探针等,本实验针对其中重要影响因素进行优化筛选,以提高杂交效率。方法通过逐一改变cdna杂交技术重要影响因素的实验条件,平行设置多组实验,从中筛选出最佳实验数据。结果与结论重复实验结果表明,杂交效率较高的条件为:浓度约为0.50μg·μl-1dna片段，溶于1×microspottingsolution(arrayittm)中，与纯化后的荧光标记在0.5%sds/10×ssc甲酰胺杂交液，在42℃杂交。