铁皮石斛s-腺苷酸脱羧酶基因dosamdc1的克隆及特征分析

s-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(s-adenosyl-l-methioninedecarboxylase,samdc)是多胺合成的关键酶,通过调节多胺的代谢途径参与植物的多项生理生化过程。本文利用cdna末端快速克隆技术(race),首次从铁皮石斛共生萌发种子中分离得到一个新的samdc基因,命名为dosamdc1(genbank注册号jx966243),并对其编码蛋白的理化性质、保守结构域等特征进行分析。生物信息学分析表明,dosamdc1基因的全长为1979bp,涵盖tiny-uorf、small-uorf和mainorf3个植物samdc基因特征orf。morf编码一条368个氨基酸的肽链,预测分子质量为40.7kd,等电点为5.2,编码蛋白不含信号肽,具有22个氨基酸的跨膜域(89～110位),具有植物samdc的典型结构特点,包括酶原剪切位点、pest结构域及催化功能必须的氨基酸。序列比对及系统发育树分析结果表明dosamdc1与单子叶植物samdc具有很高的同源性,与双子叶植物的亲缘关系较远。应用实时荧光定量pcr对dosamdc1基因在石斛不同组织中的表达模式分析发现,该基因在未接菌的植物组织中表达变化差异不大,在接菌共生萌发的植物种子中显著上调表达,为未萌发种子的2.74倍,具有受真菌侵染诱导表达的特性,揭示其可能通过参与多胺调控途径在植物？真菌共生方面发挥作用。